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雙熒光素酶報告基因檢測
雙熒光素酶報告基因檢測
更新時間:2025-01-02
型    號:
所屬分類:分子生物學(xué)實驗
報    價:2000
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提供商: 上海研謹(jǐn)生物
服務(wù)名稱: 雙熒光素酶報告基因檢測服務(wù)
規(guī)格: 實驗服務(wù)
價格: 2000元
周期: 4-6周
收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
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雙熒光素酶報告基因檢測產(chǎn)品概述:

雙熒光素酶報告基因檢測

 

 

實驗意義

 

1.可廣泛引用與miRNA的靶基因檢測,可以判斷miRNA是否與靶基因結(jié)合,也可以定量反映miRNA對目的基因的抑制作用。

 

2.轉(zhuǎn)錄因子(反式作用因子)存在DNA結(jié)合域,可以與靶標(biāo)啟動子中的特異序列(順式作用元件)進(jìn)行共價結(jié)合,從而調(diào)控基因的表達(dá),雙熒光素酶報告系統(tǒng)是檢測這類轉(zhuǎn)錄因子與基因特異序列的重要手段,是真核基因表達(dá)調(diào)控研究的常用方法。

 

實驗原理及流程

雙熒光素酶是指螢火熒光素酶和海腎熒光素酶,螢火蟲熒光素酶呈黃綠色,波長550-570nm, 海腎熒光素酶呈藍(lán)色,波長為480nm。報告基因?qū)嶒炇菍袠?biāo)啟動子的特定片段插入熒光素酶表達(dá)序列的前方,構(gòu)建帶有靶標(biāo)啟動子片段的雙報道基因質(zhì)粒,然后將待測的轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒與報告基因質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞或者其他相關(guān)細(xì)胞系,如果轉(zhuǎn)錄因子能夠激活

啟動子,則報告基因表達(dá),熒光素酶的表達(dá)量與轉(zhuǎn)錄因子作用強度成正比。加入熒光素酶底物即可根據(jù)熒光強度檢測轉(zhuǎn)錄因子與靶啟動子之間是否存在相互作用。熒光素酶報告基因可構(gòu)建在同一質(zhì)?;蛘邩?gòu)建為兩個質(zhì)粒,即轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒與靶啟動子片段質(zhì)粒。

 

實驗完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)

實驗周期: 4-6周

交付標(biāo)準(zhǔn): 雙熒光素酶報告基因檢測、鑒定結(jié)果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材.實驗步驟)、原始數(shù)據(jù)等

 

需確認(rèn)的信息

1.基因與啟動子信息

2.具體分許信息.

3.是否提供質(zhì)粒?

 

參考文獻(xiàn)

[1] Miraglia E , Nylen, Frank, Johansson K,et al. Entinostat up-regulates the CAMP gene encoding LL-37 via activation

of STAT3 and HIF-1a transcription factors[J]. Scientific Reports, 2016, 6:33274.

[2] Azimzadeh P,Olson J A,Balenga N . Reporter gene assays for investigating GPCR signaling.[J]. Methods Cell Biol,

2017:89-99.

 

其他實驗代做服務(wù)

ELISA試劑盒免費代測

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